1. Qëllimi: Kjo procedurë synon të sigurojë një procedurë të standardizuar për operacionet aseptike dhe mbrojtjen e dhomave sterile.
2. Fusha e aplikimit: laboratori i testimit biologjik
3. Personi përgjegjës: Kontrolluesi i Mbikëqyrësit të QC
4.Përkufizimi: Asnjë
5. Masat paraprake të sigurisë
Kryen në mënyrë rigoroze operacione aseptike për të parandaluar kontaminimin mikrobik; operatorët duhet të fikin llambën UV përpara se të hyjnë në dhomën sterile.
6.Procedurat
6.1. Dhoma sterile duhet të jetë e pajisur me një dhomë operacioni sterile dhe një dhomë tampon. Pastërtia e dhomës së operacionit steril duhet të arrijë klasën 10000. Temperatura e brendshme duhet të mbahet në 20-24°C dhe lagështia duhet të mbahet në 45-60%. Pastërtia e stolit të pastër duhet të arrijë klasën 100.
6.2. Dhoma sterile duhet të mbahet e pastër dhe është rreptësisht e ndaluar grumbullimi i mbeturinave për të parandaluar kontaminimin.
6.3. Parandaloni rreptësisht kontaminimin e të gjitha pajisjeve të sterilizimit dhe të mjediseve të kulturës. Ata që janë të kontaminuar duhet të ndalojnë përdorimin e tyre.
6.4. Dhoma sterile duhet të jetë e pajisur me dezinfektues me përqendrim pune, si solucion kresol 5%, alkool 70%, tretësirë klormetionine 0,1%, etj.
6.5. Dhoma sterile duhet të sterilizohet rregullisht dhe të pastrohet me dezinfektues të përshtatshëm për të siguruar që pastërtia e dhomës sterile plotëson kërkesat.
6.6. Të gjitha instrumentet, instrumentet, enët dhe sendet e tjera që duhen sjellë në dhomë sterile duhet të mbështillen fort dhe të sterilizohen me metoda të përshtatshme.
6.7. Përpara hyrjes në dhomën sterile, personeli duhet të lajë duart me sapun ose dezinfektues dhe më pas të ndërrojë rrobat e punës, këpucët, kapele, maska dhe doreza të veçanta në dhomën e tamponit (ose t'i fshijë duart përsëri me etanol 70%) përpara se të hyjë në dhomën sterile. Kryeni operacione në dhomën bakteriale.
6.8. Para përdorimit të dhomës sterile, llamba ultravjollcë në dhomën sterile duhet të ndizet për rrezatim dhe sterilizim për më shumë se 30 minuta, dhe stoli i pastër duhet të ndizet për të fryrë ajrin në të njëjtën kohë. Pas përfundimit të operacionit, dhoma sterile duhet të pastrohet në kohë dhe më pas të sterilizohet me rreze ultravjollcë për 20 minuta.
6.9. Përpara inspektimit, paketimi i jashtëm i mostrës së provës duhet të mbahet i paprekur dhe nuk duhet të hapet për të parandaluar kontaminimin. Përpara inspektimit, përdorni topa pambuku 70% alkool për të dezinfektuar sipërfaqen e jashtme.
6.10. Gjatë çdo operacioni, duhet të bëhet një kontroll negativ për të kontrolluar besueshmërinë e funksionimit aseptik.
6.11. Kur thithni lëngun bakterial, duhet të përdorni një top thithës për ta thithur atë. Mos e prekni kashtën drejtpërdrejt me gojën tuaj.
6.12. Gjilpëra e vaksinimit duhet të sterilizohet me flakë para dhe pas çdo përdorimi. Pas ftohjes, kultura mund të inokulohet.
6.13. Kashtët, epruvetat, enët Petri dhe enët e tjera që përmbajnë lëng bakterial duhet të zhyten në një kovë sterilizimi që përmban 5% tretësirë Lysol për dezinfektim dhe të nxirren dhe të shpëlahen pas 24 orësh.
6.14. Nëse ka lëng bakterial të derdhur në tavolinë ose dysheme, duhet të derdhni menjëherë solucion acid karbolik 5% ose 3% Lysol në zonën e kontaminuar për të paktën 30 minuta përpara se ta trajtoni atë. Kur rrobat e punës dhe kapelet janë të ndotura me lëng bakterial, ato duhet të hiqen menjëherë dhe të lahen pas sterilizimit me avull me presion të lartë.
6.15. Të gjitha sendet që përmbajnë baktere të gjalla duhet të dezinfektohen përpara se të shpëlahen nën rubinet. Ndalohet rreptësisht ndotja e kanalizimeve.
6.16. Numri i kolonive në dhomën sterile duhet të kontrollohet çdo muaj. Me stolin e pastër të hapur, merrni një numër enësh sterile Petri me një diametër të brendshëm 90 mm dhe injektoni në mënyrë aseptike rreth 15 ml mjedis të kulturës agar ushqyes që është shkrirë dhe ftohur në rreth 45°C. Pas ngurtësimit, vendoseni me kokë poshtë në 30 deri në 35 inkuboni për 48 orë në një inkubator ℃. Pasi të provoni sterilitetin, merrni 3 deri në 5 pjata dhe vendosini në të majtë, në mes dhe në të djathtë të pozicionit të punës. Pasi ta hapni kapakun dhe t'i ekspozoni për 30 minuta, vendosini me kokë poshtë në një inkubator 30 deri në 35°C për 48 orë dhe nxirrini jashtë. shqyrtoj. Numri mesatar i baktereve të ndryshme në pjatë në një zonë të pastër të klasës 100 nuk duhet të kalojë 1 koloni dhe numri mesatar në një dhomë të pastër të klasës 10000 nuk duhet të kalojë 3 koloni. Nëse tejkalohet kufiri, dhoma sterile duhet të dezinfektohet tërësisht derisa inspektimet e përsëritura të plotësojnë kërkesat.
7. Referojuni kapitullit (Metoda e inspektimit të sterilitetit) në "Metodat e inspektimit higjienik të barnave" dhe "Praktikat standarde të funksionimit të Kinës për inspektimin e drogës".
8. Departamenti i Shpërndarjes: Departamenti i Menaxhimit të Cilësisë
Udhëzime teknike për dhomën e pastër:
Pas marrjes së një mjedisi steril dhe materialeve sterile, ne duhet të mbajmë një gjendje sterile në mënyrë që të studiojmë një mikroorganizëm specifik të njohur ose të përdorim funksionet e tyre. Përndryshe, mikroorganizmat e ndryshëm nga jashtë mund të përzihen lehtësisht. Dukuria e përzierjes së mikroorganizmave të parëndësishëm nga jashtë quhet baktere kontaminuese në mikrobiologji. Parandalimi i kontaminimit është një teknikë kritike në punën mikrobiologjike. Sterilizimi i plotë nga njëra anë dhe parandalimi i kontaminimit nga ana tjetër janë dy aspekte të teknikës aseptike. Përveç kësaj, ne duhet të parandalojmë që mikroorganizmat në studim, veçanërisht mikroorganizmat patogjenë ose mikroorganizmat e modifikuar gjenetikisht që nuk ekzistojnë në natyrë, të shpëtojnë nga kontejnerët tanë eksperimentalë në mjedisin e jashtëm. Për këto qëllime, në mikrobiologji ka shumë masa.
Dhoma sterile është zakonisht një dhomë e vogël e ngritur posaçërisht në laboratorin e mikrobiologjisë. Mund të ndërtohet me çarçafë dhe xham. Sipërfaqja nuk duhet të jetë shumë e madhe, rreth 4-5 metra katrorë, dhe lartësia duhet të jetë rreth 2.5 metra. Një dhomë tampon duhet të ngrihet jashtë dhomës sterile. Dera e dhomës së tamponit dhe dera e dhomës sterile nuk duhet të kenë të njëjtin drejtim për të parandaluar që fluksi i ajrit të sjellë baktere të ndryshme. Si dhoma sterile ashtu edhe dhoma e tamponit duhet të jenë hermetike. Pajisjet e ventilimit të brendshëm duhet të kenë pajisje për filtrimin e ajrit. Dyshemeja dhe muret e dhomës sterile duhet të jenë të lëmuara, të vështira për t'u mbajtur papastërti dhe të lehta për t'u pastruar. Sipërfaqja e punës duhet të jetë e niveluar. Si dhoma sterile ashtu edhe dhoma e tamponit janë të pajisura me drita ultravjollcë. Dritat ultraviolet në dhomën sterile janë 1 metër larg sipërfaqes së punës. Stafi që hyn në dhomën sterile duhet të veshë veshje dhe kapele të sterilizuara.
Aktualisht, dhomat sterile ekzistojnë kryesisht në fabrikat e mikrobiologjisë, ndërsa laboratorët e përgjithshëm përdorin stol të pastër. Funksioni kryesor i stolit të pastër është përdorimi i pajisjes së rrjedhës së ajrit laminar për të hequr pluhurat e ndryshëm të vegjël duke përfshirë mikroorganizmat në sipërfaqen e punës. Pajisja elektrike lejon që ajri të kalojë përmes filtrit hepa dhe më pas të hyjë në sipërfaqen e punës, në mënyrë që sipërfaqja e punës të mbahet gjithmonë nën kontrollin e ajrit steril që rrjedh. Për më tepër, ka një perde ajri me shpejtësi të lartë në anën afër jashtme për të parandaluar hyrjen e ajrit të jashtëm bakterial.
Në vende me kushte të vështira, në vend të stolit të pastër mund të përdoren edhe kuti sterile prej druri. Kutia sterile ka një strukturë të thjeshtë dhe është e lehtë për t'u lëvizur. Ka dy vrima në pjesën e përparme të kutisë, të cilat bllokohen nga dyert me shtytje kur nuk janë në funksion. Ju mund të zgjasni krahët gjatë operacionit. Pjesa e sipërme e pjesës së përparme është e pajisur me xham për të lehtësuar funksionimin e brendshëm. Brenda kutisë ka një llambë ultravjollcë dhe enët dhe bakteret mund të futen përmes derës së vogël anash.
Teknikat e funksionimit aseptik aktualisht jo vetëm që luajnë një rol kryesor në kërkimet dhe aplikimet mikrobiologjike, por gjithashtu përdoren gjerësisht në shumë bioteknologji. Për shembull, teknologjia transgjenike, teknologjia e antitrupave monoklonale, etj.
Koha e postimit: Mar-06-2024