1. Qëllimi: Kjo procedurë synon të ofrojë një procedurë të standardizuar për operacionet aseptike dhe mbrojtjen e dhomave sterile.
2. Fusha e zbatimit: laborator testimi biologjik
3. Personi Përgjegjës: Mbikëqyrësi i Kontrollit të Cilësisë (QC) Testues
4. Përkufizim: Asnjë
5. Masat paraprake të sigurisë
Kryeni operacione aseptike në mënyrë strikte për të parandaluar kontaminimin mikrobik; operatorët duhet ta fikin llambën UV para se të hyjnë në dhomën sterile.
6. Procedurat
6.1. Dhoma sterile duhet të jetë e pajisur me një dhomë operacioni sterile dhe një dhomë tampon. Pastërtia e dhomës sterile të operacionit duhet të arrijë klasën 10000. Temperatura e brendshme duhet të mbahet në 20-24°C dhe lagështia duhet të mbahet në 45-60%. Pastërtia e bankës së pastër duhet të arrijë klasën 100.
6.2. Dhoma sterile duhet të mbahet e pastër dhe është rreptësisht e ndaluar të grumbullohen mbeturina për të parandaluar kontaminimin.
6.3. Parandaloni rreptësisht kontaminimin e të gjitha pajisjeve të sterilizimit dhe mediave të kulturës. Ato që janë të kontaminuara duhet të ndalojnë përdorimin e tyre.
6.4. Dhoma sterile duhet të jetë e pajisur me dezinfektantë me përqendrim pune, siç janë tretësira krezoli 5%, alkooli 70%, tretësira klormetionine 0.1%, etj.
6.5. Dhoma sterile duhet të sterilizohet rregullisht dhe të pastrohet me dezinfektant të përshtatshëm për të siguruar që pastërtia e dhomës sterile i plotëson kërkesat.
6.6. Të gjitha instrumentet, instrumentet, enët dhe sendet e tjera që duhen futur në dhomën sterile duhet të mbështillen fort dhe të sterilizohen me metoda të përshtatshme.
6.7. Përpara se të hyjnë në dhomën sterile, stafi duhet të lajë duart me sapun ose dezinfektant, dhe më pas të veshin rroba pune, këpucë, kapele, maska dhe doreza speciale në dhomën tampon (ose t'i fshijnë duart përsëri me 70% etanol) para se të hyjnë në dhomën sterile. Kryejnë operacionet në dhomën bakteriale.
6.8. Para përdorimit të dhomës sterile, llamba ultravjollcë në dhomën sterile duhet të ndizet për rrezatim dhe sterilizim për më shumë se 30 minuta, dhe tavolina e pastër duhet të ndizet për fryrjen e ajrit në të njëjtën kohë. Pas përfundimit të operacionit, dhoma sterile duhet të pastrohet në kohë dhe më pas të sterilizohet me dritë ultravjollcë për 20 minuta.
6.9. Para inspektimit, paketimi i jashtëm i mostrës së testimit duhet të mbahet i paprekur dhe nuk duhet të hapet për të parandaluar kontaminimin. Para inspektimit, përdorni toptha pambuku me alkool 70% për të dezinfektuar sipërfaqen e jashtme.
6.10. Gjatë çdo operacioni, duhet të bëhet një kontroll negativ për të kontrolluar besueshmërinë e operacionit aseptik.
6.11. Kur thithni lëng bakterial, duhet të përdorni një top thithës për ta thithur atë. Mos e prekni pipën direkt me gojën tuaj.
6.12. Gjilpëra e inokulimit duhet të sterilizohet me flakë para dhe pas çdo përdorimi. Pas ftohjes, kultura mund të inokulohet.
6.13. Kashtat, epruvetat, enët e Petrit dhe enët e tjera që përmbajnë lëng bakterial duhet të zhyten në një kovë sterilizimi që përmban tretësirë 5% Lysol për dezinfektim, dhe të nxirren e të shpëlahen pas 24 orësh.
6.14. Nëse në tavolinë ose dysheme derdhet lëng bakterial, duhet menjëherë të derdhni tretësirë acidi karbolik 5% ose lizol 3% në zonën e kontaminuar për të paktën 30 minuta para se ta trajtoni. Kur rrobat dhe kapelat e punës janë të kontaminuara me lëng bakterial, ato duhet të hiqen menjëherë dhe të lahen pas sterilizimit me avull me presion të lartë.
6.15. Të gjitha sendet që përmbajnë baktere të gjalla duhet të dezinfektohen para se të shpëlahen nën rubinet. Ndalohet rreptësisht ndotja e kanalizimeve.
6.16. Numri i kolonive në dhomën sterile duhet të kontrollohet çdo muaj. Me bankën e pastër të hapur, merrni një numër enësh sterile Petri me një diametër të brendshëm prej 90 mm dhe injektoni në mënyrë aseptike rreth 15 ml medium kulture agar ushqyes që është shkrirë dhe ftohur në rreth 45°C. Pas ngurtësimit, vendoseni përmbys në 30 deri në 35°C. Inkubojeni për 48 orë në një inkubator ℃. Pasi të vërtetoni sterilitetin, merrni 3 deri në 5 pjata dhe vendosini në të majtë, në mes dhe në të djathtë të pozicionit të punës. Pasi të hapni kapakun dhe t'i ekspozoni për 30 minuta, vendosini përmbys në një inkubator 30 deri në 35°C për 48 orë dhe nxirrini jashtë. Ekzaminoni. Numri mesatar i baktereve të ndryshme në pllakë në një zonë të pastër të klasit 100 nuk duhet të kalojë 1 koloni, dhe numri mesatar në një dhomë të pastër të klasit 10000 nuk duhet të kalojë 3 koloni. Nëse tejkalohet limiti, dhoma sterile duhet të dezinfektohet plotësisht derisa inspektimet e përsëritura të përmbushin kërkesat.
7. Referojuni kapitullit (Metoda e Inspektimit të Sterilitetit) në "Metodat e Inspektimit Higjienik të Barnave" dhe "Praktikat Standarde Operative të Kinës për Inspektimin e Barnave".
8. Departamenti i Shpërndarjes: Departamenti i Menaxhimit të Cilësisë
Udhëzime teknike për dhomën e pastër:
Pas marrjes së një mjedisi steril dhe materialeve sterile, ne duhet të ruajmë një gjendje sterile në mënyrë që të studiojmë një mikroorganizëm specifik të njohur ose të përdorim funksionet e tyre. Përndryshe, mikroorganizma të ndryshëm nga jashtë mund të përzihen lehtësisht. Fenomeni i përzierjes së mikroorganizmave të parëndësishëm nga jashtë quhet baktere ndotëse në mikrobiologji. Parandalimi i kontaminimit është një teknikë kritike në punën mikrobiologjike. Sterilizimi i plotë nga njëra anë dhe parandalimi i kontaminimit nga ana tjetër janë dy aspekte të teknikës aseptike. Përveç kësaj, ne duhet të parandalojmë që mikroorganizmat nën studim, veçanërisht mikroorganizmat patogjenë ose mikroorganizmat e modifikuar gjenetikisht që nuk ekzistojnë në natyrë, të shpëtojnë nga enët tona eksperimentale në mjedisin e jashtëm. Për këto qëllime, në mikrobiologji, ka shumë masa.
Dhoma sterile është zakonisht një dhomë e vogël e krijuar posaçërisht në laboratorin e mikrobiologjisë. Mund të ndërtohet me çarçafë dhe xham. Sipërfaqja nuk duhet të jetë shumë e madhe, rreth 4-5 metra katrorë, dhe lartësia duhet të jetë rreth 2.5 metra. Një dhomë tampon duhet të vendoset jashtë dhomës sterile. Dera e dhomës tampon dhe dera e dhomës sterile nuk duhet të jenë në të njëjtin drejtim për të parandaluar rrjedhën e ajrit nga sjellja e baktereve të ndryshme. Si dhoma sterile ashtu edhe dhoma tampon duhet të jenë hermetike. Pajisjet e ventilimit të brendshëm duhet të kenë pajisje filtrimi të ajrit. Dyshemeja dhe muret e dhomës sterile duhet të jenë të lëmuara, të vështira për t'u mbajtur papastërti dhe të lehta për t'u pastruar. Sipërfaqja e punës duhet të jetë e niveluar. Si dhoma sterile ashtu edhe dhoma tampon janë të pajisura me drita ultravjollcë. Dritat ultravjollcë në dhomën sterile janë 1 metër larg sipërfaqes së punës. Stafi që hyn në dhomën sterile duhet të veshë rroba dhe kapele sterilizuara.
Aktualisht, dhomat sterile ekzistojnë kryesisht në fabrikat e mikrobiologjisë, ndërsa laboratorët e përgjithshëm përdorin stola të pastra. Funksioni kryesor i stolit të pastër është përdorimi i pajisjes së rrjedhjes së ajrit laminar për të hequr pluhurat e ndryshëm të vegjël, duke përfshirë mikroorganizmat në sipërfaqen e punës. Pajisja elektrike lejon që ajri të kalojë nëpër filtrin HEPA dhe më pas të hyjë në sipërfaqen e punës, në mënyrë që sipërfaqja e punës të mbahet gjithmonë nën kontrollin e ajrit steril që rrjedh. Për më tepër, ekziston një perde ajri me shpejtësi të lartë në anën afër pjesës së jashtme për të parandaluar hyrjen e ajrit bakterial të jashtëm.
Në vende me kushte të vështira, në vend të një stoli të pastër, mund të përdoren edhe kuti sterile prej druri. Kutia sterile ka një strukturë të thjeshtë dhe është e lehtë për t’u lëvizur. Në pjesën e përparme të kutisë ka dy vrima, të cilat bllokohen nga dyer me shtytje-tërheqje kur nuk është në funksion. Mund t’i shtrini krahët brenda gjatë funksionimit. Pjesa e sipërme e pjesës së përparme është e pajisur me xham për të lehtësuar funksionimin e brendshëm. Brenda kutisë ka një llambë ultravjollcë, dhe enët dhe bakteret mund të futen përmes derës së vogël në anë.
Teknikat aseptike të operimit aktualisht jo vetëm që luajnë një rol të rëndësishëm në kërkimin dhe aplikimet mikrobiologjike, por përdoren gjerësisht edhe në shumë bioteknologji. Për shembull, teknologjia transgjenike, teknologjia e antitrupave monoklonalë, etj.
Koha e postimit: 06 Mars 2024